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噻呋酰胺人工抗原的合成及酶联免疫吸附分析方法的建立

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成果类型:
期刊论文
作者:
Li Xiao-Xiao;Ding Shu-Mao;Yang Xu;Yuan Jun-Lin*
通讯作者:
Yuan Jun-Lin
作者机构:
[Ding Shu-Mao; Yuan Jun-Lin; Yang Xu; Li Xiao-Xiao] Cent China Normal Univ, Coll Life Sci, Hubei Key Lab Genet Regulat & Integrat Biol, Wuhan 430079, Hubei, Peoples R China.
通讯机构:
[Yuan Jun-Lin] C
Cent China Normal Univ, Coll Life Sci, Hubei Key Lab Genet Regulat & Integrat Biol, Wuhan 430079, Hubei, Peoples R China.
语种:
中文
关键词:
噻呋酰胺;人工抗原;多克隆抗体;酶联免疫吸附分析
关键词(英文):
Thifluzamide;Artificial antigen;Polyclonal antibody;Enzyme linked immunosorbent assay
期刊:
分析化学
ISSN:
0253-3820
年:
2018
卷:
46
期:
1
页码:
27-32
基金类别:
(No.21577045)资助 This work was supported by the National Natural Science Foundation of China (21577045):国家自然科学基金项目
机构署名:
本校为第一且通讯机构
院系归属:
生命科学学院
摘要:
以化合物2-甲基-4-三氟甲基-5-噻唑甲酸(MTCA)为噻呋酰胺的半抗原合成人工抗原,采用活泼酯法合成免疫原MTCA-BSA,分别采用活泼酯法、混合酸酐法和N,N'-羰基二咪唑/4-二甲氨基吡啶(CDI / DMAP)法合成3种包被原MTCA-OVA-1、MTCA-OVA-2和MTCA-OVA-3。免疫动物后,最终以包被原MTCAOVA- 3筛选并获得了具有高特异性的噻呋酰胺多克隆抗体,建立了检测噻呋酰胺的间接竞争酶联免疫吸附(ic-ELISA)分析方法。本方法线性检测范围为0.08 ~ 10.00 mg /L,半数抑制浓度(IC_(50))为1.39 mg /L,检出限为0.08 mg /L,对自来水、湖水和小麦中的噻呋酰胺添加回收率在72.0%~ 128.3%之间,检测结果与HPLC法具有良好的相关性...
摘要(英文):
In the present study, 2-methyl-4-(trifluoromethyl) thiazole-5-carboxylic acid (MTCA) was acted as hapten of thifluzamide to synthesize artificial antigens. Immunogen MTCA. bovine serum albumin (BSA) was synthesized by active ester method. Meanwhile, three coating antigens, MTCA-OVA-1, MTCA-OVA-2 and MTCA-OVA-3 were synthesized by active ester method, mixed anhydride method and N, N- carbonyldiimidazole/4-dimethylaminopyridine (CDI/DMAP) method, respectively. Anti. thifluzamide polyclonal antibody with high specificity was obtained from the immunized mice, then indirect competitive enzyme linke...

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