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IspD蛋白克隆表达和及其抑制剂高通量活性筛选
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摘要
成果类型:
会议论文
作者:
周雅情;王俊丽;李伟国;涂海洋;张爱东(
张爱东
)
作者机构:
[张爱东; 周雅情; 王俊丽; 李伟国; 涂海洋] 华中师范大学农药与化学生物学教育部重点实验室化学学院
语种:
中文
关键词:
IspD蛋白表达;酶活性标定;先导化合物;高通量筛选
年:
2017
页码:
63
会议名称:
第十届全国化学生物学学术会议
会议时间:
2017-09-23
会议地点:
中国湖北武汉
基金类别:
国家自然科学基金(21407264)的支持
机构署名:
本校为第一机构
院系归属:
化学学院
摘要:
IspD蛋白是植物和细菌2C-甲基-D-赤藓糖醇-4-磷酸途径(MEP途径)的关键酶,建立IspD蛋白克隆表达及其酶抑制剂的高通量筛选方法在发展新型除草剂和杀菌剂研究中具有重要意义。本文首先尝试从拟南芥中提取总RNA,逆转录合成cD NA,采用PCR扩增,获得全长IspD基因和IspD(76-303)活性域片段基因,连接至pColdⅠ载体,构建重组表达质粒,在大肠杆菌BL21(DE3)进行了高效表
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