聚酮抗生素美达霉素(medermycin)具有抗菌和抗肿瘤等生物学活性,其生物合成途径还未阐明。本文利用生物信息学、遗传学和分析化学等手段,就其生物合成基因簇中几个相关基因展开功能分析,内容包括以下几个方面:
(1)新型C-糖基转移酶基因:根据同源性分析,推断基因med-ORF8可能负责催化美达霉素的C-C糖苷健的形成(Ichinose K.et al.,2003)。本研究首先使用目前较为常用的PCR介导的链霉菌基因突变系统(RedirectTM)对med-ORF8进行基因突变分析:完整的美达霉素生物合成基因簇导入一个特殊大肠杆菌细胞,在这个细胞内,定点敲除美达霉素生物合成基因簇中的这个目的基因med-ORF8,获得...