芹菜愈伤组织转化的初步研究
作者：
郑世学;董五辈;李学宝
期刊：
华中师范大学学报(自然科学版) ,1996年30(3):327-329 ISSN：1000-1190
作者机构：
[郑世学; 董五辈; 李学宝] 华中师范大学生命科学学院;郑州牧业专科学校
关键词：
芹菜;根癌农杆菌;遗传转化
摘要：
用根癌农杆菌C_(58)C_(1)(pBZ6111)感染芹菜胚性愈伤组织,在筛选到的氯霉素抗性愈伤组织中检测到胭脂碱合成酶活性,表明外源基因已整合到芹菜细胞基因组中并得到表达。转化愈伤组织可在无激素培养基上增殖并分化畸形苗。
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中文
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转基因油菜的花药培养
作者：
董五辈;唐桂芬;兰尊海;李学宝
期刊：
现代牧业 ,1995年(04):1-3+10 ISSN：2096-2975
作者机构：
郑州牧专;华中师范大学生物系
关键词：
转基因油菜;花药培养;诱导率;分化率;最佳激素配比
摘要：
本研究通过花药培养技术获得了6个抗Km 20mg/L的单倍体苗,其中花药愈伤组织的最高诱导率是21.6%,最佳激素配比是:Miller+2,4—D 2.0mg/L+KT1.5mg/L+IAA 2.0 mg/L,愈伤组织的苗最高分化率是18.8%,最佳激素配比是:MS+KT2.0mg/L+IAA 0.2mp/L.
语种：
中文
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亚麻下胚轴离体培养和转化的研究
作者：
李学宝;陈光荣;金波
期刊：
植物科学学报 ,1995年(04) ISSN：2095-0837
作者机构：
武汉华中师范大学生物系
关键词：
亚麻;根癌农杆菌;下胚轴离体培养;转化
摘要：
报道了亚麻（Ｌｉｎｕｍ ｕｓｉｔａｔｉｓｓｉｍｕｍ）的高频率植株再生和细胞转化。亚麻下胚轴切段培养在ＭＳＢ分化培养基上，诱导分化出不定芽。最佳的激素组合是ＢＡ２ｍｇ／Ｌ＋ＩＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ，分化频率可达９７％。在附加ＢＡ１ｍｇ／Ｌ和ＮＡＡ０．０２ｍｇ／Ｌ的ＭＳＢ培养基上，亚麻下胚轴外植体的不定芽分化频率也可达９０％以上。用根癌农杆菌（Ａｇｒｏｈａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ）感染亚麻下胚轴外植体，在含卡那霉素５０ｍｇ／Ｌ的选择培养基上筛选获得卡那霉素抗性苗，并检测到ＧＵＳ基因活性表达。表明它们是转化植株，转化频率约为２％。
语种：
中文
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TRANSGENIC PLANTS OF RUTABAGA (BRASSICA-NAPOBRASSICA) TOLERANT TO PEST INSECTS
作者：
LI, XB* ;MAO, HZ;BAI, YY
期刊：
Plant Cell Reports ,1995年15(1-2):97-101 ISSN：0721-7714
通讯作者：
LI, XB
作者机构：
[BAI, YY; LI, XB; MAO, HZ] CHINESE ACAD SCI,SHANGHAI INST PLANT PHYSIOL,NATL LAB PLANT MOLEC GENET,SHANGHAI 200032,PEOPLES R CHINA.;[LI, XB] CENT CHINA NORMAL UNIV,DEPT BIOL,WUHAN 430070,PEOPLES R CHINA.
通讯机构：
[LI, XB] C;CENT CHINA NORMAL UNIV,DEPT BIOL,WUHAN 430070,PEOPLES R CHINA.
关键词：
Brassica napobrassica;Agrobacterium tumefaciens;cryIAgene;transformation;insect-tolerance
摘要：
Cotyledons cut from axenic seedlings were immersed in Agrobacterium tumefaciens suspension which was treated with acetosyringone and nopaline at low pH overnight. The infected cotyledon explants were cultured on MSB medium (MS salts + B5 Vitamins) containing 6-BA 3mg/1 for 2-3 days, and transferred onto selective medium (MSB with kanamycin 50-100 mg/l). Kanamycin-resistant shoots were selected. More than 60 regenerated plants were obtained. About 60% of the plants showed high NPT II activity. Southern blot hybridization showed that some of the plants gave a positive signal with the insecticidal crystal protein gene (cry IA gene) probe, and exhibited tolerant to insects such as Pieris rapae (cabbage caterpillar) in leaf feeding experiments. Kanamycin-resistance and insect-resistance were maintained in the progeny. © 1995 Springer-Verlag.
语种：
英文
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凤眼莲叶片超氧物歧化酶的初步研究
作者：
李学宝;何光源;吴振斌;夏宜
期刊：
水生生物学报 ,1995年19(1):7-12 ISSN：1000-3207
作者机构：
华中师范大学生物系;中国科学院武汉植物研究所;中国科学院水生生物研究所
关键词：
凤眼莲;衰老;低温胁迫;叶;超氧化物歧化酶
摘要：
本文研究凤眼莲叶片ＳＯＤ活性与低温、ｐＨ和衰老等环境和生理因素的关系。试验结果表明，凤眼莲叶片主要含Ｃｕ－Ｚｎ－ＳＯＤ。ＫＣＮ明显抑制ＳＯＤ活性。环境ｐＨ小范围改变（自中性至弱酸弱碱）对ＳＯＤ的影响不大，只有当ｐＨ有较大变化时，酶活性才明显下降，ＳＯＤ同工酶酶带数目减少。持续低温导致ＳＯＤ活性减弱，减弱的程度与低温持续的时间呈正相关性。随着凤眼莲叶片的衰老，ＳＯＤ活性逐渐下降。老叶的ＳＯＤ活性显著低于幼叶，其同工酶带的数目也少于后者。本文还报道了叶片呼吸强度和葡萄糖－６－磷酸脱氢酶活性的变化。
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中文
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凤眼莲、水花生若干光合作用参数与酶类的研究
作者：
李学宝;何光源;吴振斌;夏宜
期刊：
水生生物学报 ,1995年19(4): 333 ISSN：1000-3207
作者机构：
华中师范大学生物系;中国科学院武汉植物研究所;中国科学院水生生物研究所
关键词：
凤眼莲;水花生;低温胁迫;光合强度;根系活力;酶活力
摘要：
在正常的生长条件下, 凤眼莲有较高的叶面系数, 叶绿素含量和光合强度。叶片可溶 性糖含量也高。在低温胁迫下, 凤眼莲和水花生根系活力和过氧化物酶、过氧化氢酶、 细胞色素氧化酶、淀粉酶等酶活性均明显下降。试验结果表明, 凤眼莲对低温胁迫较水 花生更为敏感。图2表2参15
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中文
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转基因油菜的遗传学分析
作者：
董五辈;李学宝
期刊：
现代牧业 ,1995年(03):1-4 ISSN：2096-2975
作者机构：
郑州牧专;华中师范大学生物系
关键词：
油菜;BT基因;转基因植物;遗传分析;Bt梘ene
摘要：
本文从以下几方面对油菜转Bt基因植株进行了研究:R<sub>1</sub>、R<sub>2</sub>代的Km抗性;R<sub>0</sub>、R<sub>1</sub>代的Southern杂交;R<sub>0</sub>代抗虫试验以及R<sub>0</sub>代的酯酶活力测定.实验结果分别是:经Km抗性试验,芥菜型油菜R<sub>1</sub>代在12个无性系中有10个无性系符合孟德尔单基因分离的遗传规律,R<sub>2</sub>代在7个无性系中有6个符合这一规律;分子杂交证明部分油菜植株的基因组中存在Bt基因的同源顺序,表明Bt基因已整合进植物基因组;抗虫试验的结果是芥菜型油菜叶片饲喂幼虫10d后各处理组活虫体重与对照比,有5个无性系存在显著差异,其中最高虫试死亡率是77.7%,甘蓝型油菜则有9个无性系存在显著性差异,最高死亡率是70%;酯酶活力测定的结果表明外源基因没有影响酯酶活力.
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中文
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Plant regeneration from protoplasts of immature Vigna sinensis cotyledons via somatic embryogenesis
作者：
Li, XB* ;Xu, ZH;Wei, ZM
期刊：
Plant Cell Reports ,1995年15(3-4):282-286 ISSN：0721-7714
通讯作者：
Li, XB
作者机构：
[Xu, ZH; Wei, ZM; Li, XB] CHINESE ACAD SCI,SHANGHAI INST PLANT PHYSIOL,SHANGHAI 200032,PEOPLES R CHINA.;[Li, XB] CENT CHINA NORMAL UNIV,DEPT BIOL,WUHAN 430070,PEOPLES R CHINA.
通讯机构：
[Li, XB] C;CENT CHINA NORMAL UNIV,DEPT BIOL,WUHAN 430070,PEOPLES R CHINA.
关键词：
Vigna sinensis;protoplast culture;somatic embryogenesis;plant regeneration
摘要：
Protoplasts were isolated from immature cotyledons of Vigna sinensis and cultured in a modified MS Liquid medium containing 0. 2 mg/l 2, 4-dichlorophenoxyacetic acid (2, 4-D), 1 mg/l naphthaleneacetic acid (NAA) and 0. 5 mg/l 6-benzylaminopurine (BAP) in the dark at a density of 1 × 105/ml. The protoplasts began to divide in 3-5 days. Sustained cell division resulted in formation of cell clusters and small calli, with the cell division frequency and plating efficiency of cell colonies reaching 27. 7% and 1. 7% respectively. When calli of 2 mm in size were transferred onto MSB medium (MS salts and B5 vitamins) containing 500mg/l NaCl, 500 mg/ 1 casein hydrolysate (CH), 2 mg/l 2,4-D and 0. 5 mg/l BAP for further growth, approximately 5% of the calli developed embryogenically. The embryogenic calli were selected and subcultured on the same composition of MSB medium and were able to maintain somatic embryogenesis capacity in subculture for a long time. When the calli were moved to MSB medium with 0. 1 mg/l indole-3-acetic acid (IAA), 0. 5mg/l kinetin(KT), 3-5% mannitol and 2% sucrose in the light, many somatic embryos formed from the calli. Only part of the embryoids developed further to the cotyledonary stage, and the others died at the globular, heart-shaped or torpedo stages. Finally, some cotyledonary embryoids germinated and developed into plants or shoots. The shoots were readily rooted on 1/2 strength MS medium with 0. 1-0.3 mg/l indole-3-butyric acid (IBA). The plants grew well in soil and were fertile. © 1995 Springer-Verlag.
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英文
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芥菜型油菜遗传转化的研究
作者：
秦明辉;李学宝;陈光荣;金波;毛慧珠;...
期刊：
华中师范大学学报(自然科学版) ,1994年(4):528-542 ISSN：1000-1190
作者机构：
华中师范大学生物系;[白永延; 毛慧珠] 中国科学院上海植物生理研究所;[李学宝; 金波; 陈光荣; 秦明辉] 华中师范大学
关键词：
芥菜型油菜;B．t．基因;遗传转化
摘要：
用根癌农杆菌感染芥菜型油菜子叶外植体，培养２～３ｄ，然后转到含Ｋｍ１０～２０ｍｇ／Ｌ的选择培养基上筛选转化体，在选择培养基上获得的Ｋｍ抗性苗，进一步在含Ｋｍ３０～５０ｍｇ／Ｌ的选择培养基上筛选３～４月，然后诱导生根，再生成完整植株．ＤＮＡ分子杂交证明Ｂ．ｔ．基因已整合到油菜基因组中，转化频率为１％～２％．
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紫云英细胞转化条件的研究
作者：
李学宝;白永延;许智宏;卫志明
期刊：
植物学报 ,1994年36(6):437-443+493 ISSN：1674-3466
作者机构：
华中师范大学生物系;[白永延; 卫志明; 许智宏] 中国科学院上海植物生理研究所;[李学宝] 华中师范大学
关键词：
紫云英;根癌农杆菌;聚乙二醇;基因表达
摘要：
根癌农杆菌经含乙酰丁香酮的低pH/PO~(3-)_(4)诱导培养后, 用来感染紫云英下胚轴原生质体, 随后的细胞β-葡萄糖苷酸酶(GUS)瞬间表达活性显著提高, 间接证明了上 述预培养诱导活化了细菌Vir基因, 促进了T-DNA向植物细胞转移。在PEG介导的DNA转移中, 较高的pH和Ca~(2+)浓度能够提高细胞GUS活性。质粒DNA浓度及启动子类型对外源基因在植物细胞内表达也有一定影响。采用外植体-农杆菌共�嘌� 获得GUS和新霉素磷酸 转移酶Ⅱ基因稳定表达的紫云英转化植株。图版1图3参22
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豇豆原生质体遗传转化的研究
作者：
李学宝;白永延;许智宏
期刊：
分子细胞生物学报：英文版 ,1994年27(1):109-115 ISSN：1674-2788
作者机构：
[李学宝; 白永延; 许智宏] 中科院上海植物生理所
关键词：
豇豆原生质体;转化;根癌农杆菌;瞬间表达
摘要：
<正> 豆科植物中有重要的粮食,油料及蔬菜作物,一直是国内外学者热衷研究的对象。豆科作物遗传转化的研究,虽已取得一些进展,但有关籽粒型豆科重要作物细胞转化的报道仍不多。我们以豇豆下胚轴为材料,探讨了农杆菌介导的和PEG介导的外源DNA转移到豇豆细胞的条件,并获得外源基因稳定表达的转化愈伤组织。豇豆原生质体分离与培养:豇豆种子用0.1%HgCl_2灭菌20min,无菌水冲洗数次后,置1/2MS_0培养基上萌发3—4天(25℃),在超净工作台上切取子叶。参照我们以前所采用的方法分离和培养豇豆原生质体(MS培养基)。
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影响绿豆下胚轴原生质体遗传转化的因素
作者：
李学宝;白永延;卫志明;许智宏
期刊：
植物科学学报 ,1994年(01):37-43 ISSN：2095-0837
作者机构：
华中师范大学生物系;中国科学院上海植物生理研究所
关键词：
绿豆;原生质体培养;转化;瞬间表达
摘要：
采用共培养法和ＰＥＧ法将外源基因导入绿豆下胚轴原生质体中，得到转化愈伤组织。根癌农杆菌经乙酰丁香酮等诱导物质以及低ｐＨ，低ＰＯ４＾３－预培养后，细菌Ｔ－ＤＮＡ的转移受到促进，ＧＵＳ基因表达活性明显提高。在ＰＥＧ介导的绿豆原生质体转化中，高Ｃａ＾２＋／ｐＨ有利于外源ＤＮＡ转移到植物细胞，ＧＵＳ活性较高。此外，质粒ＤＮＡ浓度和启动子类型均对外源基因的转移和表达有一定影响。
语种：
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南苜蓿组织和原生质体培养及转化试验
作者：
李学宝;白永延;许智宏
期刊：
植物科学学报 ,1993年(04):359-364+392 ISSN：2095-0837
作者机构：
华中师范大学生物系;中国科学院上海植物生理研究所;中国科学院上海植物生理研究所 武汉 430070;上海 200032
关键词：
南苜蓿;根癌农杆菌;组织和原生质体培养;植株再生;转化
摘要：
主要探讨南苜蓿子叶和下胚轴外植体、子叶原生质体培养中的器官发生及遗传转化。南苜蓿子叶和下胚轴外植体培养在附加IAA 0.5—1mg/L和细胞分裂素（BA或ZT）0.5—2mg/L的MS培养基上,在有光照的条件下诱导形成不定芽,进而再生成完整植株。子叶原生质体培养在附加2.4-D0.5mg/L和KT 0.2mg/L的B5液体培养基中,细胞分裂频率可达30—41%,原生质体来源的愈伤组织在MSB培养基（MS无机盐+B5维生素）上分化出芽。采用子叶外植体（或原生质体）-农杆菌共培养法获得转化植株（或转化组织）。GUS活性检测和胭脂碱分析表明,外源基因在转化细胞内得到稳定表达。
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中文
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dES、NaN3对水稻萌发种子几种酶类的影响
作者：
李学宝;杨学荣
期刊：
湖北农业科学 ,1992年(12):3-6 ISSN：0439-8114
作者机构：
中国科学院武汉植物研究所;华中师范大学生物系
关键词：
水稻;硫酸二乙酯;叠氮钠;种子;酶
摘要：
<正> 大量工作证明,应用物理和化学诱变剂是诱发作物突变提高突变频率的有效手段。研究诱变剂对M_1代生长发育初期生理代谢的影响,用生化指标衡量化学诱变剂对M_1代的早期效应,对于确定合适的诱变剂量以及早期发现和筛选突变体和变异系,具有一定的理论和实践意义。本文以水稻为材料,初步研究了化学诱变剂硫酸二乙酯(dES)、叠氮钠(NaN_3)对种子萌发生长初期细胞内几种酶类活性及同功酶谱的影响,分析酶活性变化与种子发芽率、幼苗生长高度的关系,试图为作物诱变育种提供一些理论依据。
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EMS对水稻幼穗培养初期淀粉酶及过氧化物酶的影响
作者：
李学宝;杨学荣
期刊：
华中师范大学学报(自然科学版) ,1989年(02):79-83 ISSN：1000-1190
作者机构：
华中师范大学生物系;华中师范大学生物系 中科院武汉植物研究所;[李学宝; 杨学荣] 华中师范大学
关键词：
甲基磺酸乙酯;水稻幼穗;酶活性
摘要：
本文以水稻幼穗为材料,研究化学诱变剂EMS对水稻幼穗培养初期淀粉酶、过氧化物酶的影响。试验结果表明,低浓度的EMS对淀粉酶活性有一定的刺激作用;但较高浓度的EMS,酶活性与EMS浓度呈负相关;过氧化物酶活性过高或过低都对培养细胞脱分化和再分化过程不利。
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EMS对水稻种子萌发生长初期的影响
作者：
李学宝;杨学荣
期刊：
湖北农业科学 ,1989年(02):4-6 ISSN：0439-8114
作者机构：
中国科学院武汉植物研究所;华中师范大学生物系
摘要：
<正> EMS（甲基磺酸乙酯）是一种有效的化学诱变剂,在诱变育种中得到广泛应用。以往的研究多注重于测定EMS对M1代种子萌发生长初期形态学上的效应,而对植物体内所发生的生理生化变化研究甚少。本文研究了EMS对水稻萌发种子呼吸强度及多种酶活性的影响,并分析了呼吸代谢与种子发芽率、幼苗生长高度、根系活力之间的关系,试图为诱变育种工作提供一点科学依据。 材料与方法 供试品种籼稻广陆矮4号,系湖北农科院惠赠。 选取饱满的水稻种子预浸泡16～18小时,然后用不同浓度（0,0.1%,0.2%,0.3%,0.6%,0.9%,1.2%）的EMS振荡处理4
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中文
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硫酸二乙酯、叠氮化钠对水稻种子萌发、幼苗初期生长的影响
作者：
李学宝;杨学荣
期刊：
植物科学学报 ,1989年(04):345-350 ISSN：2095-0837
作者机构：
中国科学院武汉植物研究所;华中师范大学生物系 武汉
关键词：
水稻;化学诱变剂;生长发育初期
摘要：
本文以水稻为材料,研究化学诱变剂dES、NaN<sub>3</sub>对种子萌发及幼苗生长发育的影响。用不同浓度的dES、NaN<sub>3</sub>处理预浸泡的水稻种子,测定种子的发芽率、发芽势、幼苗高度和根系活力,同时测定其呼吸强度和细胞色素氧化酶活性。结果表明,dES、NaN<sub>3</sub>对水稻初期生长发育具有抑制作用。种子经化学诱变剂dES或NaN<sub>3</sub>处理后,细胞呼吸强度和细胞色素氧化酶活性明显下降,种子发芽率、发芽势、幼苗生长高度和根系活力也不同程度地降低。诱变剂的剂量愈高,抑制愈强烈。由试验结果可知,化学诱变剂首先影响细胞的能量代谢活动,从而导致种子发芽率降低,幼苗生长迟缓,根系活力下降。
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植物细胞突变体及其应用前景
作者：
李学宝
期刊：
湖北农业科学 ,1987年(11):37-40 ISSN：0439-8114
作者机构：
华中师范大学生物系 中国科学院武汉植物研究所
摘要：
<正> 一、前言 突变是自然界中生物进化的基础,然而,自发突变的频率极低,而且不易选择有益的变异。1927年,Muller首先用X射线处理果蝇,发现X射线有提高突变频率的作用。此后,科学工作者开始探索采用各种物理化学因素来作为环境诱变剂以提高生物的突变率,以期从中选出具有稳定遗传性状的突变体后代。 70年代以前,大多以整体植物为材料,通过诱变。筛选突变体,直接或间接地用于作物育种或生物遗传规律的研究。由于科学技术的发展,人们建立并逐步完善了植物组织和细胞培养技术。应用细胞培养技术,人们能够把单个植物细胞象细菌一
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