四种杆状病毒血清学关系的研究
作者:
高建明;郭胜娟;彭建新;洪华珠
期刊:
生物技术,2003年13(3):24-25 ISSN:1004-311X
作者机构:
华中师范大学生命科学学院,湖北,武汉,430079;[高建明; 彭建新; 郭胜娟; 洪华珠] 华中师范大学
关键词:
多角体病毒;颗粒体病毒;免疫电泳;血清学关系
摘要:
血清学性质可作为病毒分类鉴定的依据,为此作者提纯芹菜夜蛾核多角体病毒-D克隆株(SfaMNPV-D)与棉铃虫单粒包埋核型多角体病毒(HaSNPV)、斜纹夜蛾核型多角体病毒(SLMNPV)、粉蚊夜蛾颗粒体病毒(TnGV)等四种杆状病毒的病毒粒子和多角体蛋白(颗粒体蛋白)作为抗原免疫家兔后制取抗血清,经1%琼脂糖免疫电泳,结果发现多角体病毒之间血清学关系比与颗粒体病毒血清学关系更密切.
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中文
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斜纹夜蛾核型多角体病毒DNA诱导同源昆虫细胞的凋亡
作者:
Du, CS;Peng, JX;Hong, HZ
期刊:
生物化学与生物物理进展,2002年29(4):592-596 ISSN:1000-3282
通讯作者:
Peng, J.-X.
作者机构:
[Peng, JX; Du, CS; Hong, HZ] Cent China Normal Univ, Inst Entomol, Wuhan 430079, Peoples R China.
通讯机构:
Institute of Entomology, Central China Normal University, China
关键词:
斜纹夜蛾核型多角体病毒;斜纹夜蛾细胞系;细胞凋亡
摘要:
发现野生型斜纹夜蛾核型多角体病毒(Spodoptera litura nuclear polyhedrosis virus,SpltNPV)DNA转染SL-1细胞能诱导细胞凋亡.SpltNPV-DNA转染其同源细胞系斜纹夜蛾核SL-1细胞6 h后,光镜下即可见细胞膜表面突出或形成小泡,细胞碎裂成凋亡小体,18 h后,细胞100%碎裂成凋亡小体.DAPI荧光染色显示感染细胞核渐呈半月形,直至碎裂被凋亡小体包裹.被转染的SL-1细胞DNA琼脂糖凝胶电泳呈典型梯形谱带.野生型SpltNPV病毒粒子感染的SL-1细胞既无多角体的出现,也无凋亡现象的发生.
语种:
中文
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杆状病毒诱导昆虫细胞凋亡的初步研究
作者:
姚伦广;杜昌升;彭建新;洪华珠
期刊:
微生物学报,2002年42(3):380-383 ISSN:0001-6209
通讯作者:
Yao, L.
作者机构:
[姚伦广; 杜昌升; 彭建新; 洪华珠] 华中师范大学昆虫学研究所;华中师范大学昆虫学研究所 武汉430079
关键词:
杆状病毒;斜纹夜蛾细胞系;细胞凋亡;梯形带
摘要:
细胞调亡(apoptosis)最早被定义为一种有秩序、受控制并按某种预定程序发展的生理性的自然死亡过程(kerr et al 1972),其特征是细胞收缩,染色质凝聚成块状,形成凋亡小体。但其最主要的特征是细胞DNA受到一种被激活的内源性核酸酶的降解,凝胶电泳时呈现出特征性的梯形带(Wyllie,1980)。病毒感染是常见导致细胞凋亡的重要因素,杆状病毒同样诱导昆虫细胞凋亡,同时,作为打破宿主防御体系的一种策略,杆状病毒可通过自身编码抗调亡基因的表达,抑制细胞凋亡以利于自己的增殖。细胞凋亡和病毒抗凋亡是一复杂的相互作用过程,阐述这种相互作用机制赖于建立杆状病毒及凋亡细胞病毒/细胞体系。我们的研究发现苜蓿银纹夜蛾核型角体病毒(Autographa californica nuclear polyhedrosis virus, AcNPV)和芹菜夜蛾核型多角体病毒(Syngrapha falifera nuclear polyhedrosis virus, SfaNPV)感染斜纹夜蛾(Spodoptera litura)SL-1细胞后,均诱导SL-1细胞凋亡。
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甜菜夜蛾核型多角体病毒vp39基因重组真核表达质粒的构建及鉴定
作者:
段媛媛;杨成丽;周建刚;范文韬;彭建新;...
期刊:
华中师范大学学报(自然科学版),2002年36(3):345-347,352 ISSN:1000-1190
作者机构:
[段媛媛; 杨成丽; 周建刚; 范文韬; 彭建新; 江月; 刘德立] 华中师范大学生命科学学院;华中师范大学生命科学学院 武汉430079
关键词:
iel启动子;核衣壳蛋白基因(vp39);基因克隆;真核表达
摘要:
利用DNA重组技术,将杆状病毒极早期基因iel启动子基因克隆至重组质粒pGEM-Se39中,成功地构建了重组真核表达质粒pGEM-IEl-Se39。
语种:
中文
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一株高水平表达重组蛋白昆虫细胞系的建立
作者:
洪华珠;彭建新
期刊:
昆虫学报,2001年44(3):276-281 ISSN:0454-6296
作者机构:
[洪华珠; 彭建新] 华中师范大学生命科学学院
关键词:
粉纹夜蛾;细胞系;重组蛋白
摘要:
报道了一株来自粉纹夜蛾Trichoplusia ni脂肪体的传代细胞系,在辅以5%胎牛血清的商品无血清培养基Excell 400中,细胞群体倍增时间为22.9h,最高密度可达2.2×10~(6)/mL,该细胞对苜蓿丫纹夜蛾多粒包埋型多角体病毒(AcMNPV)极为敏感,增殖AcMNPV多角体平均每个细胞达86个,表达由AcMNPV构建的重组蛋白的水平较高,#beta#-半乳糖苷酶的表达水平为(225.5±13.4)IU/mL;碱性磷酸酶的表达水平为(4.7±0.61)IU/mL,是一株高水平表达重组蛋白的传代细胞系,命名为HNU-Tn-FB1。
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苏云金芽孢杆菌Cry1C毒素对昆虫细胞的毒力
作者:
郑丙莲;杨红;彭建新;洪华珠
作者机构:
[郑丙莲; 杨红; 彭建新; 洪华珠] 华中师范大学昆虫所
会议名称:
全国生物防治暨第八届杀虫微生物学术研讨会
会议时间:
2000-11-25
会议地点:
中国广东珠海
关键词:
苏云金杆菌;Cry1C毒素;昆虫细胞系;毒力测定
摘要:
<正>将携带有Cry1C编码基因的pUC19质粒载体转到大肠杆菌BL21菌株中,经37℃培养48小时后可获得单基因的Cry1C杀虫晶体毒素蛋白提取物。以此粗提物溶解于50mmol/L Nas2COs3/HCl(pH9.5)中,经胰酶消化后可用细胞的毒力测定。测定方法:接种对数期生长的细胞于96孔板中,28℃培养过夜后,弃上清,加入系列梯度稀释的毒素蛋白作用液,30分钟后,弃上清,加入MTT液,反应
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酶学分析在昆虫抗有机农药研究中的应用
作者:
张善明;彭建新;余泽华;洪华珠
期刊:
湖北农学院学报,2000年20(03):281-284 ISSN:1004-3888
作者机构:
沙洋师范高等专科学校自然系,湖北,沙洋,448200;华中师范大学昆虫所,湖北,武汉,430079
关键词:
昆虫;酶学;抗性;有机农药;水解酶;氧化酶
摘要:
概述了抗有机农药的不同昆虫的酶类的活性变化。抗性品系的水解酶类和氧化酶类均有明显的变化 ,即对水解酶类而言 ,酯酶活力尤其是羧酸酯酶活力增加 ,但乙酰胆碱酯酶则变化不明显或敏感性下降 ;对氧化酶类而言 ,则多功能氧化酶的活力升高
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生物杀虫剂的研究进展与展望
作者:
张善明;姚伦广;彭建新;洪华珠
期刊:
长江大学学报(社会科学版),2000年(02):100-104 ISSN:1673-1395
作者机构:
沙洋师范专科学校自然系!448200;华中师范大学昆虫系!430079
关键词:
生物杀虫剂;微生物杀虫剂;植物杀虫剂;苏云金杆菌;川楝素;G-P复合生物杀虫剂
摘要:
从微生物杀虫剂和植物杀虫剂两方面概述了生物杀虫剂的研究现状及发展方向。
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苏云金芽孢杆菌Cry1C毒素对昆虫细胞的毒力研究
作者:
郑丙莲;杨红;彭建新;洪华珠
期刊:
中国病毒学:英文版,2000年(S1):249-249 ISSN:1674-0769
作者机构:
华中师范大学昆虫所
关键词:
苏云金芽孢杆菌;Cry1C毒素;昆虫细胞;细胞系;华中师范大学;毒力测定;埃及伊蚊;毒素蛋白;粉纹夜蛾;甜菜夜蛾
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八种昆虫离体细胞系对灭多威农药的敏感性研究
作者:
郑丙莲;杨红;洪华珠;彭建新;周青春
期刊:
生物技术通报,2000年(5):30-32,42 ISSN:1002-5464
作者机构:
华中师范大学昆虫所,武汉,430079
关键词:
昆虫离体细胞;灭多威;敏感性;细胞病变
摘要:
采用MTT法 ,研究了灭多威农药对八种昆虫离体细胞系敏感性的差异。结果显示 ,同一浓度处理下 ,不同细胞系细胞病变的程度不同 ,敏感性差异很大。LC50 值在 10 2 ~ 10 5μg/ml范围内变化 ,其中 ,白纹伊蚊细胞系是最敏感的 ,而小菜蛾细胞系几乎不敏感
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昆虫病毒增强蛋白的研究新进展
作者:
廖玲洁;彭建新;洪华珠
期刊:
中国生物防治学报,1999年15(1):41-44 ISSN:2095-039X
作者机构:
华中师范大学昆虫所,武汉,430079;[廖玲洁; 彭建新; 洪华珠] 华中师范大学
关键词:
昆虫病毒;增强蛋白;围食膜
摘要:
本文综述近年来对颗粒体病毒增强蛋白基因克隆、生化特性、增效机理的研究,还述及核型多角体病毒基因组中增强蛋白的同源基因以及痘病毒增强蛋白的研究新进展。
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测定昆虫细胞存活或死亡的MTT方法的改进
作者:
周青春;洪华珠;罗勤;万树青;汪虹;...
期刊:
应用昆虫学报,1998年35(3):165-167,159 ISSN:2095-1353
作者机构:
华中师范大学农药化学研究所;[洪华珠; 罗勤; 汪虹; 彭建新] 华中师范大学生命科学院;[周青春; 万树青] 华中师范大学农药化学所
关键词:
MTTI测定;甲--;昆虫细胞活性
摘要:
MTT方法具有灵敏、简便、稳定可靠、不需同位素等特点。为了摸索测定昆虫细胞存活(或死亡)的MTT方法的各种最适条件,本文以中国棉铃虫细胞系为对象,确定了一些基本参数、并比较了三种MTT测定方法。结果表明:改进的方法所选用的溶剂——pH为4.5的3%SDS异丙醇效果最好,溶解甲所需时间短、OD值高。测定昆虫细胞范围为每孔500~60000细胞,测试波长为560nm,参考波长为690nm.
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杆状病毒在微载体培养细胞中的增殖特性
作者:
惠丰立;彭建新;陈曲侯
期刊:
中国生物防治学报,1997年13(4):187-189 ISSN:2095-039X
作者机构:
[惠丰立] 南阳师范高等专科学校生物系;[彭建新; 陈曲侯] 华中师范大学昆虫所
关键词:
杆状病毒;微载体;培养细胞;增殖特性
摘要:
杆状病毒在微载体培养细胞中的增殖特性惠丰立彭建新陈曲侯(南阳师范高等专科学校生物系,南阳473061)(华中师范大学昆虫所,武汉430070)STUDYONTHEPROPAGATIONOFBACULOVIRUSINMICROCARRIERCELLCU...
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利用MTT法测定杀虫剂对细胞的毒力
作者:
周青春;万树青;刘钊杰;洪华珠;彭建新;...
期刊:
植物保护学报,1996年23(4):343-348 ISSN:0577-7518
作者机构:
华中师范大学农药化学研究所;[洪华珠; 彭建新; 汪虹] 华中师范大学昆虫所;[周青春; 万树青; 刘钊杰] 华中师范大学农药化学所
关键词:
细胞毒力测定;杀虫剂;棉铃虫
摘要:
MTT方法是Mosmann(1983)首创的一种鉴别、统计细胞死或活的方法。本文通过改进MTT方法,以棉铃虫的细胞系(BCIRL—HA—AMI)为测试对象,建立起一种适应农药毒力测定的细胞生物测定方法。该方法比传统活体生物测定要快捷、简便、准确、灵敏。本文用改进的方法研究了5种有机溶剂和9种杀虫剂(或化合物)的离体毒力,5种有机溶剂除二甲苯外,丙酮、乙酸乙酯、二甲亚砜、N,N—二甲基甲酰胺在低浓度(0.5%,v/v)时与空白对照无显著差异。结果还表明,除溴氰菊酯和氯丹外,其它7种有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂(或化合物)的细胞生物测定结果与传统活体生物测定结果相关性很好,这表明MTT细胞生物测定方法可能不适用于菊酯和有机氯类杀虫剂的筛选和毒力测定,但对有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂而言,它仍是一种有效的离体生物测定方法。
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芹菜夜蛾NPV在粉纹夜蛾细胞系中复制增殖的研究
作者:
龙小纯;杨红;彭建新;洪华珠
作者机构:
[龙小纯; 杨红; 彭建新; 洪华珠] 华中师范大学昆虫所
会议名称:
中国有害生物综合治理学术讨论会
会议时间:
1996-12-02
会议地点:
中国云南昆明
关键词:
菜夜蛾NPV;粉纹夜蛾细胞系;离体复制;生物测定;棉铃虫
摘要:
芹菜夜蛾NPV能够在粉纹夜蛾卵细胞系克隆株细胞中有效地复制增殖。病毒在受染细胸中的复制和其它核型多角体病毒的离体复制特征大体相似。病毒感染率达70%,多角体产量为3.98×108PIBs/ml。平均每个细胞产20个多角体。病毒增殖动力学显示:感染后72h,胞外病毒粒子达最大滴度,其TCID50值为7.59×107TCID50/ml。常规生物测定测得收获的多角体对棉铃虫一龄末幼虫的L
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粉纹夜蛾5BI细胞的悬浮培养
作者:
彭建新;杨红;洪华珠;潭文松
期刊:
华中师范大学学报(自然科学版),1996年30(4):472-475 ISSN:1000-1190
作者机构:
[彭建新; 杨红; 洪华珠] 华中师范大学昆虫所;[潭文松] 华东理工大学生化工程所
关键词:
粉纹夜蛾;5BI细胞;悬浮培养
摘要:
报道了粉纹夜蛾5BI细胞在转瓶系统悬浮培养及血清浓度、细胞接种浓度、非离子表面活性剂Plurnic F-68等对细胞生长的影响与作用。实验结果显示:5BI细胞能够在搅拌条件下,在含5%血清培养基中正常生长增殖,当血清浓度降至2%时,细胞生长速率产生较明显变化;Pluronic F-68对细胞生长有显著的保护作用。5BI细胞适宜于悬浮培养和进一步放大培养。
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杆状病毒DNA复制研究的某些进展
作者:
彭建新;陈曲侯
期刊:
病毒学报,1995年11(1):93-97 ISSN:1000-8721
作者机构:
武汉华中师范大学昆虫学研究所
关键词:
杆状病毒DNA;复制研究
摘要:
杆状病毒DNA复制研究的某些进展彭建新,陈曲侯(武汉华中师范大学昆虫学研究所,武汉430073)杆状病毒DNA是最大的环状DNA分子,其基因组大小在90─230kb之间,具有编码近百种蛋白质的能力。杆状病毒基因根据表达的时序性分为早期基因和晚期基因。...
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两种昆虫细胞的微载体培养
作者:
彭建新;陈曲侯
期刊:
应用昆虫学报,1993年(2):118-120 ISSN:2095-1353
作者机构:
华中师范大学昆虫研究所;华中师范大学昆虫研究所 武昌 430070;武昌 430070
关键词:
微载体培养;昆虫细胞
摘要:
斜纹夜蛾细胞系(SL-1)和家蚕细胞系(BmN)均能在国产微载体上正常生长增殖。以3mg/ml微载体培养细胞,两种昆虫细胞生长最高密度分别为8.2×10~5细胞/ml和7.6×10~5细胞/ml。扫描电镜观察显示一个微载体可贴附几十个,有的多达上百个细胞。两性昆虫细胞的微载体培养特征与常规静止培养无甚差异。
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家蚕胚胎细胞系BM-21E-HNU5的生物学特征研究
作者:
黎路林;余泽华;彭建新;陈曲侯
期刊:
华中师范大学学报(自然科学版),1991年(04):86-90 ISSN:1000-1190
作者机构:
华中师范大学生物系
关键词:
细胞系;生长特征;同工酶;病毒敏感性
摘要:
细胞抽提物经等电聚焦电泳分析显示6条酯酶同工酶带。等电点分别为pH5.25,5.33,5.40,5.50,5.65和5.70。病毒感染实验结果表明,该细胞系可以支持VHA-273,PcrNPV,AcNPV和PXGV等四种杆形病毒的复制增殖。
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斜纹夜蛾NPV-DNA限制性内切酶分析及多角体蛋白的某些理化性质
作者:
彭建新;黎路林;赵细康;张鸿雁;陈曲侯
期刊:
华中师范大学学报(自然科学版),1991年025(04):474-478 ISSN:1000-1190
作者机构:
华中师范大学生物系
关键词:
斜纹夜蛾NPV;限制性内切酶;角体蛋白
摘要:
斜纹夜蛾NPV-DNA经限翩性内切酶EooRI和BamHI完全消化,分别产生22条和15条片断,测得DNA平均分子量为75.26×105道尔顿。多角体蛋白经超离心,Sepharose 6B柱层析纯化,PAGE为一条均匀带;高碘酸-schiff反应阳性,多角体蛋白含有多糖;多角体蛋经显示酸性类脂的Niles兰染色呈阴性。
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